自 COVID-19 出现以来,ICL 的微生物实验室一直从事关于溴化杀生物剂对抗病毒功效的前沿研究。结果不仅证明了它们的有效性,而且还吸引了对开发基于溴的抗病毒应用感兴趣的领先研究人员、研发专家和服务公司的兴趣。
2019 年 12 月,一种新的病毒爆发开始了一系列事件,这些事件将改变我们所知道的世界。两个月后,也就是 2020 年 2 月,世界卫生组织正式将这种新型病毒性疾病命名为 COVID-19,它是 2019 年冠状病毒病的简称。COVID-19 迅速在全球范围内传播恐慌,主要是因为它具有高度传染性。由于它是一种新疾病,它的影响仍然未知。同样未知的是从 COVID-19 病原体中对环境(水、食物、气溶胶和表面)进行消毒的方法。因此,找到一种能够从各种环境中消除病毒的足够消毒剂成为全球的核心优先事项。
建立针对 COVID-19 的杀菌效果
ICL 决心解决寻找可以从环境中消除病毒的合适化学品的需求。ICL 的微生物学专家开始寻找一种简单而令人满意的方法来验证对病毒的杀菌效果。经过深思熟虑,决定采用MS2大肠杆菌噬菌体作为人类致病病毒指标的生物杀灭剂抗病毒活性检测方法。
噬菌体是感染细菌的病毒,而大肠杆菌噬菌体是感染大肠杆菌的一类噬菌体。使用大肠杆菌噬菌体作为人类病毒的病毒指标的概念在文献中已经确立,但几乎从未在微生物实验室中用作有效测试。一些研究表明,大肠杆菌噬菌体 MS2( Leviviridae家族的单链 RNA [ssRNA] 噬菌体)可用作抗病毒和防腐剂有效性的定量标记(参考文献 1 和参考文献 2) . 在多项灭菌、空气过滤和雾化研究中,噬菌体 MS2 已被用作病原病毒的替代物。它被文化检测到的便利无疑是其广泛使用的原因之一(参考文献 3)。
一些研究表明,噬菌体 MS2 对雾化、采样和紫外线的抵抗力是冠状病毒的 7 到 10 倍(参考文献 3)。因此,基于这一发现,如果 ICL 的溴基杀生物剂被发现对 MS2 有效,那么它们肯定对其他致病病毒也有效,包括冠状病毒。
开始研究
IMI 微生物实验室采用的方法基于“水和废水检查的标准方法”。第 22 版。部分:SM 9224C”。
该方法基于使用双琼脂层 (DAL)。底层是硬琼脂(标准琼脂),上层放置在硬琼脂上,是软琼脂、宿主细菌和被测噬菌体样品的混合物。孵育后,检查获得的噬菌斑数量(亮区)。每个斑块代表一个感染区域,即细菌细胞被噬菌体裂解的区域。噬菌体的数量与样品的稀释度和获得的噬菌斑数量有关(图 1)。
图片1
上述方法在IMI微生物实验室同化后,几种溴化ICL
测试了杀菌剂,并将其活性与商业次氯酸钠(漂白剂)进行了比较。如图 1 所示,发现漂白效率在 100 mg/l(以 Cl 2计)的浓度开始(达到总杀灭)。然而,ICL 的溴基杀菌剂 (Bactebrom ® ) 效率(达到总杀灭)建立在 5 mg/l(以 Cl 2计)的低得多的浓度下——如图 2 所示。这些结果表明 ICL 的杀菌剂具有活性浓度非常低,与漂白剂相比更有效。
图 1:NaOCl(漂白剂)对噬菌体 MS2 的活性
图 2:Bactebrom (ICL) 对噬菌体 MS2 的活性
溴化杀菌剂的优点
除了 Bactebrom,ICL 的微生物实验室团队还测试了其他几种针对浮游病毒的溴化杀生物剂,结果非常令人满意。
活性溴化钠 (NaBr) 在浓度为 2-3 mg/l(以 Cl 2计)时变得有活性,并在 4 mg/l 时达到全效 - 如图 3 所示。ICL 开发的另一种溴化杀生物剂Bromosol ®显示在浓度为 12.5-75 mg/l(以 Cl 2计)之间具有活性抗病毒特性,在 100 mg/l 时达到全效 - 如图 4 所示。
与次氯酸钠相比,这一比较进一步展示了 ICL 溴化杀生物剂在病毒根除方面的优势。
图 3:针对噬菌体 MS2 的活化溴化钠 (ICL) 活性
图 4:溴溶胶 (ICL) 对噬菌体 MS2 的活性
展望未来
由于 ICL 的溴化杀生物剂对浮游病毒显示出积极的结果,ICL 的微生物实验室计划进行进一步的研究。首先,这将包括测试活化溴化铵(ICL 开发的另一种溴化杀生物剂)对浮游生物 MS2 的功效。此外,该团队将继续针对 MS2 测试经过处理的纺织品和表面。根据结果,实验室团队将测试相关的基准产品,以绘制出各种可能的应用。
参考
1. Deborah A. Kuzmanovic、Ilya Elashvili、Charles Wick、Catherine O'Connell 和 Susan Krueger。2003. 噬菌体 MS2:小角中子散射和病毒计数对蛋白质和 RNA 成分的分子量和空间分布。结构,卷。11, 1339–1348。爱思唯尔科学有限公司
2. Eva Emmoth、Jakob Ottoson、Ann Albihn、Sa´ndor Bela´k 和 Björn Vinnerås。2011. 用于消除单链 RNA 病毒的孵化场废物的氨消毒。应用和环境微生物学,p。3960–3966 卷。77、12号
3. Nathalie Turgeon、Marie-Josée Toulouse、Bruno Martel、Sylvain Moineau 和 Caroline Duchaine。2014. 五种噬菌体作为病毒气溶胶研究模型的比较。应用与环境微生物学 vol 80 (14) p. 4242–4250